動物疫病檢測常用技術，按檢測目標可分為兩大類：病原學檢測（查病原體本身）和血清學檢測（查抗體，反映感染/免疫狀態）；再按技術原理與應用場景，可分為快速篩查技術、精準確診技術和傳統經典技術。下面按實用性和普及度，從常用到專業，逐一說明。

 

一、病原學檢測技術（直接查病毒/細菌/寄生蟲等）

 

1.快速篩查類（現場/基層首選，快、簡、成本低）

 

（1）膠體金免疫層析技術（試紙條/快速卡）

 

原理：抗原-抗體特異性結合，在膜上形成可見色帶。

 

常用疫病：非洲豬瘟、口蹄疫、豬瘟、藍耳、新城疫、禽流感、布病、弓形蟲等。

 

特點：

 

優點：10–20分鐘出結果、無需儀器、操作簡單、適合現場/基層初篩。

 

缺點：靈敏度/特異性低于PCR，不能單獨作為重大疫病確診依據，僅用于初篩。

 

判定：C線（質控）+T線（檢測）顯色=陽性；僅C線=陰性；C線不顯色=無效。

 

（2）普通PCR（常規PCR）

 

原理：體外擴增病原特異性核酸片段，電泳觀察條帶。

 

常用疫病：多數病毒病（豬瘟、藍耳、禽流感、新城疫、口蹄疫等）、細菌病（布病、副豬嗜血桿菌等）。

 

特點：

 

優點：靈敏度高、特異性強，可區分病原型/亞型。

 

缺點：需PCR儀+電泳，耗時約2–4小時，不能定量。

 

判定：出現與陽性對照一致的特異性條帶=陽性；無條帶=陰性。

 

2.精準確診類（實驗室核心，用于復核/確診/定量）

 

（1）實時熒光定量PCR（qPCR/Real-timePCR）

 

原理：PCR過程中實時監測熒光信號，通過Ct值判定并定量。

 

常用疫病：非洲豬瘟、口蹄疫、高致病性禽流感、豬瘟、藍耳、偽狂犬、細小病毒等重大/優先防控疫病。

 

特點：

 

優點：靈敏度最高、特異性強、可定量、防污染、結果客觀，是目前病原檢測金標準級技術。

 

缺點：儀器昂貴、試劑成本高、需專業人員。

 

判定：Ct≤規定閾值（如35/38）=陽性；Ct>閾值=陰性；臨界Ct=疑似，需復檢。

 

（2）數字PCR（dPCR）

 

原理：將反應體系微滴化，單分子擴增，絕對定量。

 

應用：極低載量病原檢測（如早期感染、潛伏感染）、病毒載量精確定量、轉基因/病原分型。

 

特點：比qPCR更靈敏、抗干擾強，但成本更高，多用于科研/精準診斷。

 

（3）病毒分離/細菌分離培養

 

原理：用細胞/雞胚/培養基培養病原，觀察CPE（細胞病變）/典型菌落，再鑒定。

 

常用疫病：

 

病毒：口蹄疫、禽流感、新城疫、豬瘟、藍耳等（需細胞/雞胚）。

 

細菌：豬鏈球菌、副豬嗜血桿菌、大腸桿菌、沙門氏菌、布氏桿菌等（需培養基）。

 

特點：

 

優點：獲得活病原，是確診金標準，可用于致病性試驗、疫苗研發、藥敏試驗。

 

缺點：耗時最長（病毒3–7天，細菌1–3天）、操作復雜、生物安全要求高。

 

判定：出現典型CPE/菌落+生化/血清/分子鑒定確認為目標病原=陽性；盲傳2–3代無陽性=陰性。

 

（4）基因測序（一代/二代測序）

 

原理：測定病原核酸序列，與數據庫比對，確定病原種類/亞型/變異株。

 

應用：病原鑒定、分型、溯源、變異監測（如禽流感H5/H7亞型、口蹄疫型/亞型、非洲豬瘟變異株）。

 

特點：結果最準確，可發現新病原/變異株，但成本高、周期長（1–3天），多用于疫情溯源與科研。

 

3.其他病原學技術

 

（1）免疫熒光技術（IFA/間接免疫熒光）

 

原理：熒光標記抗體與病原結合，熒光顯微鏡下觀察特異性熒光。

 

應用：病毒（如豬瘟、藍耳、偽狂犬）、細菌（如布病）的細胞/組織切片檢測，可定位病原。

 

特點：特異性強，可直觀觀察病原位置，需熒光顯微鏡。

 

（2）免疫組化（IHC）

 

原理：酶標記抗體，顯色反應定位組織中的病原。

 

應用：病理組織中病原定位（如非洲豬瘟、豬瘟、偽狂犬的組織檢測），結合病理診斷。

 

（3）電鏡技術（EM）

 

原理：電子顯微鏡直接觀察病毒形態。

 

應用：未知病毒初步鑒定、病毒形態學觀察（如冠狀病毒、輪狀病毒）。

 

特點：直觀，但靈敏度低、設備昂貴、操作復雜，多用于科研。