血液RNA核酸免提取試劑盒

試劑盒應用

本試劑盒采用特殊裂解液B從新鮮全血、抗凝血、血凝塊中提取并純化RNA。整個過程僅需要10分鐘。采用硅基材質吸附柱，高效專一吸附RNA，保證提取高純度、高產量RNA。該裂解液配方中含有RNA保護劑，能夠抑制RNA降解、保護RNA完整，從而提高RNA產量。提取RNA可用于RT-PCR、RT-qPCR、Northern Blot、分子克隆、文庫構建等。

本試劑盒僅供研究使用，不可用于臨床、食品、化妝品等領域。

試劑盒組成

備注：1、第一次使用前，在洗滌液BW2中加入48mL無水乙醇，并標記“√"和時間，避免重復加入。

保存條件

室溫保存一年。

自備材料

水浴鍋或金屬浴、無水乙醇、1.5mL無RNase離心管、蛋白酶K（20mg/mL，或貨號QR0301）、DNase I（2U/μL，或貨號QR0102）

使用方法

1. 300μL血液（不足300μL，無菌PBS補齊）中加入500μL裂解液B和10μL蛋白酶K，顛倒混勻。

2. 55℃孵育2分鐘。

備注：如果RNA提取量比較低，可延長孵育時間到10分鐘。

3. 12,000rpm離心30秒。取750μL上清。

4. 加入0.5倍體積無水乙醇，上下顛倒混勻，

5. 全部加入RNA吸附柱中，12,000rpm離心30秒，倒掉收集管中廢液。

6. 向RNA吸附柱中加入500μL洗滌液BW1，12,000rpm離心30秒，倒掉收集管中廢液。

7. 向RNA吸附柱中加入500μL洗滌液BW2，12,000rpm離心30秒，倒掉收集管中廢液。

8. 重復步驟7一次。

9. 12,000rpm離心2分鐘，倒掉收集管中廢液。

10. 將RNA吸附柱放入新1.5mL無RNase離心管中，加入30-50μL洗脫液B，室溫放置1分鐘。

11. 12,000rpm離心2分鐘，得到RNA溶液，-80℃保存。

注意事項

1. 務必在超凈臺中進行操作，常換手套，防止RNA降解。

2. 盡可能使用新鮮樣本進行RNA提取。

3. 使用無DNase無RNase的吸頭和離心管，防止RNA降解，常更換吸頭，防止交叉污染。

4. 為了提高洗脫效率，可提前將洗脫液B置于65℃水浴后再使用。

5. 根據后續試驗需求，請使用DNase I（貨號QR0102）進行基因組清除。

常見問題解析